1 抗體藥物偶聯(lián)物的藥物抗體偶聯(lián)比分析 (ODP2 HP-4B)

抗體藥物偶聯(lián)物(Antibody-Drug Conjugate; ADC)是將低分子藥物通過化學(xué)鍵與單克隆IgG的半胱氨酸殘基及賴氨酸殘基相結(jié)合，作為同時(shí)具備抗體藥物和低分子藥物優(yōu)點(diǎn)的新一代藥物而備受關(guān)注。ADC的藥物抗體偶聯(lián)比(Drug Antibody Ratio; DAR)是品質(zhì)管理的一項(xiàng)重要指標(biāo)。以下是使用聚合物基質(zhì)反相色譜柱ODP2 HP-4B利用疏水色譜模式，按照DAR從小到大的順序分析市售的半胱氨酸型ADC的應(yīng)用實(shí)例。(圖中的DAR后面的數(shù)字表示低分子藥物的結(jié)合數(shù))。

Sample : 5 µL
SigmaMAb ADC Mimic  1 mg/mL
(in H2O)

Column: Shodex ODP2 HP-4B (4.6 mm I.D. x 50 mm)

Eluent: 

(A) 1.5 M (NH4)2SO4 in 50 mM Sodium phosphate buffer (pH7.0)

(B) 50 mM Sodium phosphate buffer (pH7.0)/IPA=75/25

High pressure linear gradient;

(B %) 0 % to 100 % (0 to 20 min), 100 % (20 to 30 min),

100 to 0 % (30 to 30.01 min), 0 % (30.01 to 35 min)

Flow rate: 0.8 mL/min

Detector: UV (280 nm)

Column temp.: 30 ℃

2 抗體藥物偶聯(lián)物的SEC分析

以下是使用水溶性SEC(GFC)色譜柱PROTEIN LW-803分析抗體藥物偶聯(lián)物制劑的應(yīng)用實(shí)例。確認(rèn)了除單體外的二聚體峰。LW-803適用于抗體藥物偶聯(lián)物凝聚體雜質(zhì)的分析。
Sample : 20 µL
Antibody-drug conjugate
formulation 5 mg/mL
(in H2O)
1. Dimer
2. Monomer

Column: Shodex PROTEIN LW-803 (8.0 mm I.D. x 300 mm)

Eluent: 50 mM Sodium phosphate buffer (pH7.0) + 0.3 M NaCl/CH3CN=90/10

Flow rate: 1.0 mL/min

Detector: UV (280 nm)

Column temp.: 25 ℃

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